Awọn Ilana ati Awọn ọna ti Itupalẹ Pipo nipasẹ Liquid Chromatography

Ilana ipinya ti kiromatogirafi omi da lori iyatọ ninu isunmọ ti awọn paati ninu adalu fun awọn ipele meji.

Ni ibamu si awọn ipele iduro ti o yatọ, kiromatografi omi ti pin si kiromatografi olomi-lile, kiromatogirafi olomi-omi ati kiromatogirafa alakoso ti o somọ.Lilo pupọ julọ jẹ chromatography olomi-lile pẹlu gel silica bi kikun ati kiromatografi alakoso ti o ni asopọ pẹlu microsilica bi matrix.

Ni ibamu si awọn fọọmu ti adaduro ipele, omi kiromatogirafi le ti wa ni pin si iwe kiromatogirafi, iwe kiromatogirafi ati tinrin Layer kiromatogirafi.Gẹgẹbi agbara adsorption, o le pin si chromatography adsorption, chromatography ipin, chromatography paṣipaarọ ion ati chromatography permeation gel.

Ni awọn ọdun aipẹ, eto ṣiṣan omi ti o ga julọ ti ni afikun si eto chromatography ti ọwọn omi lati jẹ ki apakan alagbeka ṣan ni iyara labẹ titẹ giga lati mu ipa ipinya pọ si, nitorinaa ṣiṣe-giga (ti a tun mọ ni giga-titẹ) chromatography omi. ti farahan.

APA
01 Ilana ti Itupalẹ Pipo ti Kiromatography Liquid

Lati ṣe iwọn lori ipilẹ ti agbara, awọn nkan mimọ ni a nilo bi awọn iṣedede;

Isọdiwọn kiromatogirafi olomi jẹ ọna pipo ti o jo: iyẹn ni, iye ti itupalẹ ninu adalu jẹ iṣiro lati iye ti a mọ ti apẹẹrẹ boṣewa mimọ.

APA
02 Ipilẹ fun Quantification nipasẹ Liquid Chromatography

Iye paati ti a ṣewọn (W) jẹ ibamu si iye esi (A) (giga giga tabi agbegbe oke), W=f×A.

Okunfa atunse pipo (f): O jẹ ibakan deede ti agbekalẹ iṣiro pipo, ati pe itumọ ti ara ni iye paati ti wọn ni ipoduduro nipasẹ iye idahun ẹyọkan (agbegbe oke).

Iwọn atunṣe iwọn le ṣee gba lati iye ti a mọ ti apẹẹrẹ boṣewa ati iye esi rẹ.

Ṣe iwọn iye esi ti paati aimọ, ati iye paati le ṣee gba nipasẹ ifosiwewe atunse pipo.

APA
03 Wọpọ awọn ofin ni pipo onínọmbà

Apeere (ayẹwo): ojutu ti o ni atupale fun itupalẹ chromatographic.Pin si boṣewa ati aimọ awọn ayẹwo.

Standard: Ọja mimọ pẹlu ifọkansi ti a mọ.Apeere ti a ko mọ (aimọ): Adalu ti ifọkansi rẹ ni lati ṣe idanwo.

Iwọn ayẹwo: Iwọn atilẹba ti ayẹwo lati ṣe idanwo.

Dilution: Ifilelẹ dilution ti apẹẹrẹ aimọ.

Ẹya ara: awọn chromatographic tente oke lati wa ni pipo atupale, ti o jẹ, awọn analyte ti akoonu ti ko ba mọ.

Iye paati (iye): akoonu (tabi ifọkansi) ti nkan na lati ṣe idanwo.

Integerity: Ilana iširo ti wiwọn agbegbe tente oke ti chromatographic tente nipasẹ kọnputa kan.

Iyipada iwọntunwọnsi: Titẹ laini ti akoonu paati dipo iye idahun, ti iṣeto lati iye ti a mọ ti nkan boṣewa, ti a lo lati pinnu akoonu aimọ ti itupalẹ naa.

APA
04 Onínọmbà Pipo ti Chromatography Liquid

1. Yan ọna chromatographic ti o dara fun itupalẹ pipo:

l Jẹrisi tente oke ti paati ti a rii ati ṣaṣeyọri ipinnu kan (R) ti o tobi ju 1.5

l Ṣe ipinnu aitasera (mimọ) ti awọn oke chromatographic ti awọn paati idanwo

l pinnu ipinnu wiwa ati opin iwọn ti ọna naa;ifamọ ati ila ila

2. Ṣeto iṣipopada isọdiwọn pẹlu awọn apẹẹrẹ boṣewa ti awọn ifọkansi oriṣiriṣi

3. Ṣayẹwo awọn išedede ati konge ti pipo ọna

4. Lo sọfitiwia iṣakoso chromatography ti o baamu lati ṣe imuse ikojọpọ ayẹwo, ṣiṣe data ati awọn abajade ijabọ

APA
05 Idanimọ ti awọn oke giga (didara)

Ni agbara ṣe idanimọ tente oke chromatographic kọọkan lati jẹ iwọn

Ni akọkọ, lo apẹẹrẹ boṣewa lati pinnu akoko idaduro (Rt) ti tente oke chromatographic lati ṣe iwọn.Nipa ifiwera akoko idaduro, wa paati ti o baamu si oke chromatographic kọọkan ninu apẹẹrẹ aimọ.Ọna agbara chromatographic ni lati ṣe afiwe akoko idaduro pẹlu apẹẹrẹ boṣewa.Apejuwe Ti ko toìmúdájú siwaju sii (didara)

1. Standard afikun ọna

2. Lo awọn ọna miiran ni akoko kanna: awọn ọna chromatographic miiran (yi ilana pada, gẹgẹbi: lilo oriṣiriṣi awọn ọwọn chromatographic), awọn aṣawari miiran (PDA: lafiwe spectrum, wiwa ile-ikawe spectrum; MS: iṣiro titobi pupọ, wiwa ile-ikawe spectrum)

3. Awọn ohun elo miiran ati awọn ọna

APA
06 Ìmúdájú ti Quantitative Peak Consistency

Jẹrisi aitasera giga chromatographic (mimọ)

Rii daju pe paati iwọn kan ṣoṣo ni o wa labẹ oke chromatographic kọọkan

Ṣayẹwo fun kikọlu lati awọn nkan isọpọ (awọn aimọ)

Awọn ọna fun Ìmúdájú ti Chromatographic Peak Consistibility (Mimọ)

Ifiwera Spectrograms pẹlu Photodiode Matrix (PDA) Awọn aṣawari

Peak ti nw Identification

2996 Mimọ Angle Yii

Awọn ọna pipo ti a lo nigbagbogbo ni APA 07

Ọna ti tẹ boṣewa, pin si ọna boṣewa ita ati ọna boṣewa inu:

1. Ita boṣewa ọna: julọ lo ninu omi kiromatogirafi

Orisirisi awọn ayẹwo boṣewa ti awọn ifọkansi ti a mọ ni a pese sile ni lilo awọn ayẹwo mimọ ti awọn agbo ogun lati ṣe idanwo bi awọn apẹẹrẹ boṣewa.itasi sinu iwe titi de iye esi (agbegbe oke).
Laarin awọn sakani kan, ibatan laini to dara wa laarin ifọkansi ti apẹẹrẹ boṣewa ati iye esi, eyun W= f×A, ati pe a ṣe titẹ boṣewa kan.

Labẹ awọn ipo idanwo kanna gangan, lọsi apẹẹrẹ aimọ lati gba iye esi ti paati lati ṣe iwọn.Gẹgẹbi olùsọdipúpọ mọ f , ifọkansi ti paati lati ṣe iwọn le ṣee gba.

Awọn anfani ti ọna boṣewa ita:iṣẹ ti o rọrun ati iṣiro, o jẹ ọna pipo ti a lo nigbagbogbo;ko si nilo fun paati kọọkan lati wa-ri ati eluted;boṣewa ayẹwo wa ni ti beere;awọn ipo wiwọn ti apẹẹrẹ boṣewa ati apẹẹrẹ aimọ yẹ ki o wa ni ibamu;iwọn didun abẹrẹ yẹ ki o jẹ kongẹ.

Awọn aila-nfani ti ọna boṣewa ita:Awọn ipo idanwo ni a nilo lati jẹ giga, gẹgẹbi ifamọ ti aṣawari, oṣuwọn sisan, ati akopọ ti apakan alagbeka ko le yipada;iwọn didun ti abẹrẹ kọọkan yẹ ki o ni atunṣe to dara.

2. Ti abẹnu boṣewa ọna: deede, ṣugbọn wahala, julọ lo ninu awọn ọna boṣewa

Iwọn ti a mọ ti boṣewa inu ni a ṣafikun si boṣewa lati ṣe boṣewa ti o dapọ, ati lẹsẹsẹ ti awọn iṣedede iṣẹ ti ifọkansi ti a mọ ti pese.Ipin molar ti idiwọn si boṣewa inu ninu boṣewa idapọmọra ko wa ni iyipada.Wọ sinu ọwọn kiromatografi ki o mu (agbegbe ayẹwo boṣewa/agbegbe tente oke ayẹwo ti inu) bi iye esi.Ni ibamu si ibatan laini laarin iye esi ati ifọkansi ti boṣewa iṣẹ, eyun W= f× A, a ṣe ọna ti o yẹ.

Iwọn ti a mọ ti boṣewa inu ni a ṣafikun si apẹẹrẹ aimọ ati itasi sinu ọwọn lati gba iye esi ti paati lati ṣe iwọn.Gẹgẹbi olùsọdipúpọ mọ f , ifọkansi ti paati lati ṣe iwọn le ṣee gba.

Awọn abuda ti ọna boṣewa inu:Lakoko iṣẹ ṣiṣe, apẹẹrẹ ati boṣewa inu jẹ idapọpọ ati itasi sinu iwe chromatographic, niwọn igba ti ipin ti iye paati ti a wiwọn si boṣewa inu ninu ojutu adalu jẹ igbagbogbo, iyipada iwọn iwọn ayẹwo kii yoo ni ipa lori awọn abajade pipo..Ọna boṣewa inu n ṣe aiṣedeede ipa ti iwọn ayẹwo, ati paapaa apakan alagbeka ati aṣawari, nitorinaa o jẹ deede diẹ sii ju ọna boṣewa ita lọ.

APA
08 Awọn Okunfa ti o ni ipa Awọn abajade Analysis Quantitative

Ipeye ti ko dara le fa nipasẹ:

Isopọpọ agbegbe tente oke ti ko tọ, ibajẹ ayẹwo tabi awọn idoti ti a ṣafihan lakoko igbaradi ayẹwo, vial ayẹwo ko ni edidi, apẹẹrẹ tabi iyipada epo, igbaradi apẹẹrẹ ti ko tọ, awọn iṣoro abẹrẹ ayẹwo, igbaradi boṣewa inu inu ti ko tọ

Awọn idi ti o le ṣee ṣe fun titọ ti ko dara:

Isopọpọ tente oke ti ko tọ, abẹrẹ tabi awọn iṣoro injector, jijẹ ayẹwo tabi awọn idoti ti a ṣafihan lakoko igbaradi ayẹwo, awọn iṣoro chromatographic, idahun aṣawari ti bajẹ